单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗体阳性鱼类特喜欢的人、寡核苷酸呈现代价昂扬或操作使用过程麻烦。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯专家教授项目团队在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低费用、跨植物物种、全手机平台兼容的全新解决方案。

刊物详细资料

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内科学学有效性院基因性与生长发育菌物学论述方案所和国内基因性论述会牵头的国外学术研究论述杂志学术期刊杂志杂志，专业专注于新闻稿性命科学学有效性和药学基因性学方面的亿人性论述方案重大成就。JGG 202多年度影响力成分7.1，Scopus学术研究论述杂志学术期刊杂志杂志评议指标体系CiteScore 9.9，榜排JCR 202多年度GENETICS & HEREDITY方面Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY方面Q1区，榜排国内科学学有效性院杂志学术期刊杂志杂志区域菌物学小类1区(Top杂志学术期刊杂志杂志)，基因性学和生化学与分子结构菌物学小类双1区。

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些到底什么是HEATag

正确的“二合并”规划

HEATag是由凝集素和HUH内切酶制成的相结合蛋清

「追踪定位器」摸块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化遮盖（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「对接器」功能模块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）指数长条码去共价接。

“1+1>2”的效率：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样表标志与追根。

Fig1: HEATag许多符号目的举手图

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实战经验检定

HEATag才是有大多能打？

就可以在的不同条件下，进行乳期哺乳动物神经元核系单神经元核混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。探析拜谱生物为 HEATag 设施了多轮 “经济抗压测试仪”，从上皮生殖细胞系到上皮生殖细胞结构，从常溫到超低温，从新鲜范例到调整范例，全定位验证通过它的稳定性和稳定性。

独二轮检测对於辅乳动植物内部系：研发成员进行了出自人、鼠、仓鼠4个外来外来外来物种的哪几种内部（HEK293T、K562、MEF、CHO），在环境温度下能 HEATag 标记符号后混后测序。最终能够环保再生资源回收的 11447 个内部中，85.66% 都能经由 HEATag 条状码更准确筛选到原外来外来外来物种，模板间重叠严重污染非常少，UMAP 聚类概述概述无论是进行证明材料，HEATag 条状码与外来外来外来物种非特异朋友什么是基因组结构特征宽度高度。 然后接着，考试生活的水平进一次版本升级：调查相关的人员试在 4℃下标上新鲜的度生殖神经细胞系膜膜、在空调温度下标上甲醇加固不变生殖神经细胞系膜膜，甚至于简单标上生殖神经细胞系膜膜核。结论依旧吸睛：很多生活的水平下，样品产品标签与种类信息查询均有着挺好的相关的性，拆成精准率超 95%。即使是甲醇加固不变会以至于较轻的转录本交错式污染破坏，生殖神经细胞系膜膜核化学合成会现少量的 RNA 离职，生殖神经细胞系膜膜款式的注音结论依旧与新鲜的度样品始终保持相一致，表明 HEATag 可以标上各不相同加工处理生活的水平下的实验报告样品。

Fig2: HEATag 可在不相同情况下完工单神经元转录组混样介绍

能够标记符号哺乳期部分植物和海域无脊柱部分植物的原代细胞膜

若果说生殖细胞膜系测验是 “基础知识题”，那组织开展模本那就是 “扣除题”， 这类模本虽然因生殖细胞膜款式有难度、场景自我调节性特俗，是标上的技术的 “难题”，而 HEATag 正好在这类 “难题” 上体现了优越性。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸组织结构，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不禁能被合理判断，全部的关键癌细胞款式的聚类分析法最终都流畅可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海洋能动物的匹配性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长条码与鱼类转录组极具较高不一样性，未有因高盐生活环境促使的 “标记符号不能正常工作”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可实行喂母乳软体动物组织机构样表重量 scRNA-seq 解析

Fig4: HEATag可改变新鲜感深海无脊柱部分动物重量 scRNA-seq 定量分析

HEATag与受损细胞的融合会出现转录组的可观优化

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在到位标注世界任务的时候，不用对前因后果的转录多组分析引起侵扰，绝对了研究方案数据资料的真的性。

Fig5: HEATag也不会应响样例的 RNA 展现模试

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未来是什么可期

HEATag 能为单细胞膜研究探讨给我们一些？

HEATag 的实际价值，远不仅仅于 “防止标上大问题”，它的智能化性和共通性，还在为单肿瘤细胞研究方案打開较多也许性

从运用场面来讲

HEATag 能涉及从 “简简单单较解析”（如癌策划 与一切正常策划 、治疗药物正确处理与比）到 “大小性性分析”（如策划 细胞核核图谱绘图、高通芯片量选择）的全时间范围需要量。因为 PIP-seq、Stereo-cell 等轻型可存储能力的发展前景，HEATag 还能进第一步改善单细胞核核分析的通量，助推器科研管理创业团队实施更大小性性的好项目。

从跨教育领域提升空间来谈

HEATag 往往可在转录组学，还能与表观基因遗传组学、核脂肪酸组学、个人空间组学等技木紧密结合，凭借个性数据库索引和寡核苷酸编码序列，HEATag 可能轻易溶入不相同的组学步骤，不关系无线信号截获深入。同時，鉴于HEATag还可能进展单内部糖组学探索技木。

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公司合作动图

拜谱海洋生物与陈凯院士取得最初战略合作需求

非常值得点赞的是，在 HEATag 新水平水平显显出许许多多选用前沿技术成长性的大环境下，拜谱生态学已与我国南部浮游动物地理学与工程建设前力本职工作室（杭州）陈凯硕士生导师制定目标进行初步协同作战有意向。对方计划表重点围绕 HEATag 新水平水平的文化产业的发展落实、教育科技研究探讨变为等的方向进行进一步协同作战，积极推动上述低料工费、跨动物群的单内部符号新水平水平速度快选用前沿技术于具体情况教育科技研究探讨画面，为较多本职工作室带来了提高效率、经济能力的单内部研究探讨平台，机械助力教育科技研究探讨本职工做者在内部生态学学、浮游动物生态学学、问题机制化等前沿技术获得较多冲刺